新型冠狀病毒(2019-nCoV) 抗原檢測(cè)試劑盒
注冊(cè)證號(hào):國械注準(zhǔn)20223400361
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3月11日,國家衛(wèi)健委消息,為進(jìn)一步優(yōu)化新冠病毒檢測(cè)策略,服務(wù)疫情防控需要,經(jīng)研究,國務(wù)院應(yīng)對(duì)新型冠狀病毒肺炎疫情聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制綜合組決定在核酸檢測(cè)基礎(chǔ)上,增加抗原檢測(cè)作為補(bǔ)充,并組織制定了《新冠病毒抗原檢測(cè)應(yīng)用方案(試行)》。
消息一出,朋友圈轟轟烈烈地被“抗原自檢”一詞霸屏,抗原檢測(cè)正式加入防疫戰(zhàn)線,開啟全民ART時(shí)代。
很多人或許對(duì)于抗原檢測(cè)并不是很了解,今天我們就來捋一捋這些檢測(cè)手法之間有何區(qū)別。
一般檢查病毒是否入侵人體,主要的檢測(cè)方法有三種,分別是核酸檢測(cè)、抗原檢測(cè)和抗體檢測(cè),前二者屬于直接檢測(cè)病原體的方法。
我們先對(duì)幾個(gè)檢測(cè)名詞做下介紹:
? 核酸檢測(cè):檢測(cè)的是病毒的遺傳物質(zhì),如DNA或RNA。如果檢測(cè)結(jié)果為陽性,說明病毒的遺傳物質(zhì)存在于患者體內(nèi),患者正處于感染期,可直接確診為感染病例;
? 抗原檢測(cè):檢測(cè)的是病毒的組成蛋白。如果操作規(guī)范檢測(cè)結(jié)果為陽性,說明患者體內(nèi)含有病毒的組成成分,患者正處于感染期。
(圖片來源上觀新聞)
? 抗體檢測(cè):檢測(cè)的是患者體內(nèi)免疫系統(tǒng)為應(yīng)對(duì)病毒感染而產(chǎn)生的特異性蛋白。如果檢測(cè)結(jié)果為陽性,說明患者體內(nèi)存在針對(duì)該病毒的抗體,患者正處于感染期或已經(jīng)康復(fù),可作為輔助手段幫助確診感染。
目前該檢測(cè)隨著新冠疫苗接種的普及和接種率的提高,已逐漸退出舞臺(tái),被中和抗體檢測(cè)所取代;
這三種檢測(cè)方法的窗口期也是有區(qū)別的:
① 人在病毒感染后,病毒中的遺傳物質(zhì)會(huì)迅速擴(kuò)增,在發(fā)病早期即可被檢測(cè)到;
② 隨后病毒的抗原蛋白被大量表達(dá),在患者體內(nèi)含量快速達(dá)到峰值;
③ 在發(fā)病后的7-14天內(nèi),患者體內(nèi)免疫系統(tǒng)開始先后產(chǎn)生應(yīng)對(duì)病毒的IgM和IgG抗體,其中IgM會(huì)在較短時(shí)間內(nèi)消失,而IgG會(huì)長時(shí)間存在于患者體內(nèi)。
(新冠病毒檢測(cè)方法的窗口期示意圖)
從上圖我們可以看到在感染早期,核酸/抗原的產(chǎn)生早于抗體,診斷的窗口期更短。并且核酸/抗原的產(chǎn)生不像抗體那樣易受宿主免疫狀態(tài)的影響,可用于免疫虛損人群。除此之外,核心抗原摩爾數(shù)與核酸拷貝數(shù)遵循正相關(guān)關(guān)系,因此,檢測(cè)核心抗原的臨床價(jià)值和核酸重疊,即,都是病毒復(fù)制的直接指標(biāo)。
下面我們重點(diǎn)來說說【核酸檢測(cè)】和【抗原檢測(cè)】之間到底是怎么如何檢測(cè)的?
「核酸」檢測(cè)
自新冠疫情發(fā)生以來,“核酸檢測(cè)”一詞變成了我們生活中的高頻詞,大家對(duì)它或多或少都有所了解。
核酸檢測(cè)依然是目前用來確診新冠病毒感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”,具有早期診斷、靈敏度和特異性高等特點(diǎn)。
(圖片來源網(wǎng)絡(luò))
核酸檢測(cè)使用最廣泛的是實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR技術(shù)。檢測(cè)的靶標(biāo)序列一般是指高度保守的 ORF1ab 基因、核衣殼蛋白 N 基因、包膜蛋 白 E 基因和刺突糖蛋白 S 基因。依據(jù)《新型冠狀病毒感染的肺炎實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)指南》SARS-CoV-2 擴(kuò)增位置常見于 ORF1ab 和 N基因兩個(gè)靶標(biāo)。同一份標(biāo)本需滿足雙靶標(biāo)陽性或重復(fù)檢測(cè)為單靶標(biāo)陽性或兩種標(biāo)本同時(shí)滿足單靶標(biāo)才能確認(rèn)SARS-CoV-2病毒核酸陽性。
01 核酸檢測(cè)的原理
以新冠病毒獨(dú)特的基因序列為檢測(cè)靶標(biāo)。在檢測(cè)過程中,先采用RT-PCR技術(shù)將新冠病毒的核酸(RNA)逆轉(zhuǎn)錄為對(duì)應(yīng)的cDNA;再采用熒光定量PCR技術(shù),將得到的DNA進(jìn)行大量復(fù)制,同時(shí),使用特異性探針對(duì)復(fù)制過程中的DNA進(jìn)行檢測(cè),打上標(biāo)記。如果檢測(cè)樣本中存在新冠病毒核酸,儀器就可以捕捉到熒光信號(hào),并且隨著DNA的不斷復(fù)制,熒光信號(hào)不斷增強(qiáng),這樣就間接檢測(cè)到了新冠病毒的存在。
如果樣本中沒有病毒,由于沒有靶基因的擴(kuò)增,也就捕捉不到熒光信號(hào)增強(qiáng)。所以,核酸檢測(cè)其實(shí)就是通過檢測(cè)熒光信號(hào)的累積來確定樣本中是否有病毒核酸。
02 五個(gè)步驟檢測(cè)新冠病毒
核酸檢測(cè)程序需要經(jīng)過五個(gè)步驟,樣本采集、提取RNA、RT成cDNA,PCR擴(kuò)增、結(jié)果分析,這一過程需要專業(yè)人員在特定的實(shí)驗(yàn)室和高靈敏的檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)操作才能完成。
「抗原」檢測(cè)
抗原檢測(cè)并不是一項(xiàng)新出的技術(shù),而是被廣泛應(yīng)用于人類及動(dòng)物的傳染病檢測(cè)中。最常見的就是早早孕,乙肝兩對(duì)半、HIV檢測(cè)試劑。
01 抗原檢測(cè)原理
新冠病毒有四種主要的結(jié)構(gòu)蛋白:刺突蛋白(S蛋白),核衣殼蛋白(N蛋白),膜蛋白(M蛋白)和包膜蛋白(E蛋白),可作為免疫原,在病毒感染人體后,刺激漿細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體。
依據(jù)雙抗體夾心法的原理,樣本滴加在樣本墊上,通過液相層析依次通過結(jié)合墊,NC膜上的檢測(cè)線(T線)和質(zhì)控線(C線)。結(jié)合墊內(nèi)含有標(biāo)記的抗原特異性抗體,可以與樣本中的抗原(病毒蛋白)發(fā)生結(jié)合,當(dāng)液流到達(dá)檢測(cè)線(T線)時(shí),固定在這條線上的第二種抗原特異性抗體再次與抗原結(jié)合,將會(huì)呈現(xiàn)陽性結(jié)果。質(zhì)控線(C線)包被IgG抗體,可以結(jié)合樣本墊中抗體,用于判斷層析過程是否順利。
目前已經(jīng)批準(zhǔn)的抗原檢測(cè)產(chǎn)品,多是以新冠病毒N蛋白作為抗原檢測(cè)的靶標(biāo),使用特異結(jié)合新冠N蛋白的抗體去抓取病毒,再通過生化反應(yīng)把抓取的信號(hào)放大到能肉眼觀測(cè)的程度。
02 四個(gè)步驟檢測(cè)新冠病毒
1. 采集樣本,將樣本處理液滴至標(biāo)本處理管中;
2. 將取樣拭子攪拌并擠壓管壁,使標(biāo)本充分洗脫至處理液中;
3. 取出檢測(cè)卡,向加樣孔中加樣;
4. 等待15分鐘,判讀結(jié)果。
“抗原篩查,核酸診斷”
新冠病毒的核酸、抗體、抗原檢測(cè)各有側(cè)重,不能相互替代。
(圖片來源國家衛(wèi)健委臨檢中心)
核酸檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)顯而易見,靈敏度、高特異性強(qiáng)。當(dāng)然缺點(diǎn)也是顯而易見的,操作復(fù)雜,需由醫(yī)護(hù)人員采樣。采樣后,需要專業(yè)的檢驗(yàn)人員使用PCR儀進(jìn)行檢測(cè),周期較長。
而抗原檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)在于檢測(cè)速度快,操作簡便,無需實(shí)驗(yàn)室和檢測(cè)設(shè)備等??乖瓩z測(cè)的局限性在于相對(duì)核酸檢測(cè)由于沒有擴(kuò)增過程,導(dǎo)致敏感性偏低,并且覆蓋病程短,一般在感染的第3-7天檢測(cè)比較靈敏,對(duì)于病毒載量較低及無癥狀人群檢測(cè)靈敏度不夠。根據(jù)《新冠病毒抗原檢測(cè)應(yīng)用方案(試行)》,抗原陽性結(jié)果可用于對(duì)疑似人群的早期分流和快速管理,但不作為新冠病毒感染的確診依據(jù)。
2021年以來,抗原檢測(cè)已經(jīng)活躍在歐美等多個(gè)國家和地區(qū),在大范圍普篩自查中起到了重要作用。
3月18日,國家衛(wèi)健委發(fā)布推廣“抗原篩查、核酸診斷”的監(jiān)測(cè)模式。將分子生物和免疫水平檢測(cè)相結(jié)合,發(fā)揮各自優(yōu)勢(shì),分層檢測(cè)。隔離觀察人員,有疑似癥狀人群及有抗原自檢需求的人群可用抗原檢測(cè)作為快速篩查幾次,一旦陽性,應(yīng)及時(shí)再去做核酸檢測(cè)確認(rèn),兩種方法同步進(jìn)行,有利于提高早發(fā)現(xiàn)能力,提高監(jiān)測(cè)預(yù)警靈敏度,降低檢測(cè)成本,為各種可能的風(fēng)險(xiǎn)人群提供雙重保障。
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